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G1021-10ML Cellule nécrotique de cellules nécrotiques de propitionnement Iodure Pi

Spécification:10ml
Utilisation du produit:Coloration nucléaire de cellules nécrotiques ou de tissus
Stockage et transport:Stocké à 4 ° C et protégé de la lumière, valable 6 mois.
ml:
  • G1021-10ml
  • Servicebio

Description du produit


Description du produit

PI, ou iodure de propidium, est un analogue de bromure d'éthidium, qui peut fortement se lier à l'ADN. Il libère une fluorescence rouge après avoir été insérée dans l'ADN à double brin pour obtenir la coloration de l'ADN ou des noyaux cellulaires. PI ne peut pas pénétrer la membrane cellulaire intacte, mais peut pénétrer dans la membrane cellulaire endommagée des cellules apoptotiques tardives et des cellules mortes. Profitant de cette fonctionnalité, PI est généralement utilisé en combinaison avec des sondes fluorescentes telles que Calcein-AM ou FDA pour tacher et observer des cellules vivantes et mortes. Ou utilisez la cytométrie de flux pour détecter l'apoptose cellulaire et le cycle de cellule quantitativement. La longueur d'onde d'excitation maximale du complexe d'ADN Pi-double-brin est de 535 nm et la longueur d'onde d'émission maximale est de 615 nm.


La solution de coloration PI de ce produit est prête à être utilisée, avec une concentration PI de 100 μg / ml, qui peut être utilisée directement pour la coloration nucléaire de cellules nécrotiques ou de tissus, et la suspension cellulaire peut être colorée avec cette solution de coloration. Pour la détection de cycle de cellule par cytométrie de flux.


Utilisation du produit
Nom du produit

Code

Spécificité

Pi tache

G1021-10ml

10 ml


Usage:

Étapes de fonctionnement pour la cytométrie de flux pour détecter le cycle cellulaire:


1. Les cellules vivantes en culture sont digérées, lavées avec du PBS et collectées par centrifugation à basse vitesse pour obtenir des pellets cellulaires.

2. Ajoutez lentement 1-3 ml d'éthanol à 90% pré-refroidis à -20 ° C à la granule de cellule, remettez en suspension les cellules dans un bain de glace pendant une nuit.

3. Centrifugeuse à 1500 tr / min pendant 5 minutes pour collecter les cellules, remettre en suspension dans du PBS et centrifuger à nouveau pour éliminer le surnageant.

4. Ajoutez 250 μL PBS pour remettre en suspension les cellules.

5. Ajoutez 2 μL de RNase A (WRGR8021 recommandé) à une concentration de 1 mg / ml et de bain d'eau à 37 ° C pendant 40 min.

6. Ajoutez 50 μL de solution de coloration PI et incubez-le dans l'obscurité pendant 20 minutes (le temps peut être ajusté en fonction des résultats de la coloration des matériaux expérimentaux).

7. Détection de cytométrie de flux.


Étapes de fonctionnement de la fluorescence Microscope Observation des cellules vivantes et mortes:


1. Après les cellules adhérentes cultivées, retirez le milieu et lavez deux fois avec du PBS.

2. Diluez la solution de coloration PI 10 à 20 fois avec du PBS pour préparer une solution de coloration PI avec une concentration finale de 5-10 μg / ml. Ajoutez une quantité appropriée de solution de travail de la coloration PI au puits pour couvrir les cellules et incuber pendant 5 à 10 minutes à la température ambiante dans le noir.

3. Jeter le travail de coloration, ajouter du PBS pour couvrir les cellules et observer avec un microscope à fluorescence. Les noyaux de cellules mortes ou de cellules apoptotiques tardives présentent une fluorescence rouge.



Remarques

1. Les colorants fluorescents ont le problème de la trempe. Il est recommandé de terminer le test le même jour après la teinture.

2. Veuillez porter des gants de laboratoire et des gants jetables pendant le fonctionnement.

Emballage et expédition

Tous nos produits seront emballés dans un carton standard.

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