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G2002-100ML 100 ml Strong Ripa lyse tampon pour cellule

Spécification:100 ml
Usage:Lyse rapide des cellules et des tissus.
Transport et stockage:Transport de sac de glace humide; Stocker à 4Et éloignez-vous de la lumière, valable 18 mois.
ml:
  • G2002-100ML
  • Servicebio

Description du produit

Aperçu

Le tampon de lyse de Ripa (tampon de lyse de Ripa) est une solution traditionnelle rapide pour les cellules et les tissus. Les échantillons de protéines obtenus à partir de tissus et cellules clivées par Ripa Lysate peuvent être utilisés pour la page de routine, l'occidental, l'immunoprécipitation (IP), la co-IP et d'autres expériences. Le fluide de craquage hippa a de nombreuses formulations, selon son effet de fissuration est principalement divisé en forte, moyen et faible trois types. Ce produit est un puissant liquide de craquage de Ripa. Ses composants principaux incluent 50 mm Tris-HCl (pH 7,4), NaCl de 150 mm, 1 mM EDTA-2NA, 1% TRITON X-100, 1% acide désoxycholique de sodium et 0,1% SDS.Ce produit convient aux tissus animaux ou végétaux. et des échantillons de cellules, peuvent également être utilisés pour des échantillons fongiques ou bactériens.

Composant

G2002-30ML

G2002-100ML

Tampon de lyse de Ripa (fort)

30 ml

100 ml

Utilisation du produit


Usage:

L'inhibiteur de la protéase est fourni. Le lysat de Ripa (fort) doit être ajouté avec des inhibiteurs de protéase avant utilisation. G2006, G2007, G2008, etc., sont recommandés pour prévenir la dégradation des protéines. Le lysat de Ripa (fort) mentionné dans l'utilisation suivante signifie que les inhibiteurs de la protéase ont été ajoutés.

Pour les échantillons de tissus:

1. Les blocs de tissus ont été lavés avec du PBS pré-refroidi (G4202 recommandé) pour éliminer les taches de sang, puis couper en petits morceaux et placés dans l'homogénéisateur.

2. Ajoutez un volume de tissu 10x de tampon de lyse RIPA (solide) et homogénat à basse température (il est recommandé d'utiliser un instrument de meulage des tissus à grande vitesse KZ-III-F et KZ-III-FP, qui est développé et produit indépendamment par ServiceBio ). Remarque: la quantité de lysate de Ripa (solide) peut être ajoutée dans un rapport d'environ 50 mg de tissu à 1 ml de lysat. Si la teneur en protéines de tissu est faible, la posologie de lysat peut être réduite pour augmenter la concentration en protéines dans une solution d'extraction brute.

3. Transférer l'homogénat sur un tube de 1,5 ml de centrifugeuse et osciller. Bain de glace pendant 30 min, au cours de laquelle la pipette a été blown à plusieurs reprises pour assurer la lyse complète des cellules de tissu;

4.Pour 12000g échantillons, il doit être centrifugé pendant 5 min et collecter le surnageant, qui est la solution de protéine totale.

Pour des échantillons adhérents:

1. Lavez les cellules avec du PBS pendant 2 à 3 fois et blotez soigneusement le liquide résiduel pour la dernière fois.

2. Verser le lysat de Ripa (fort) dans la plaque de culture de la cellule et le ballon selon le rapport de lysace de cellules de 250 μl par puits de la plaque de 6 puits, secouez la plaque de culture et du ballon de manière répétée et faites du lysat complètement en contact avec des cellules pendant 3- 5 min.

3. Grattez les cellules avec une spatule cellulaire et collectez-vous dans un tube centrifuge.

4. Centrifuge à 12 000 g pendant 5 min et collectez le surnageant, qui est la solution de protéine totale.

Pour la cellule de suspension:

1. Lavez les cellules avec du PBS pendant 2 à 3 fois et blotez soigneusement le liquide résiduel pour la dernière fois.

2. Verser le lysat de Ripa (fort) dans la plaque de culture de la cellule et le ballon selon le rapport de lysace de cellules de 250 μl par puits de la plaque de 6 puits, secouez la plaque de culture et du ballon de manière répétée et faites du lysat complètement en contact avec des cellules pendant 3- 5 min.

3. Grattez les cellules avec une spatule cellulaire et collectez-vous dans un tube centrifuge.

4. Centrifuge à 12 000 g pendant 5 min et collectez le surnageant, qui est la solution de protéine totale.



Remarques:

1. L'épaisseur peut apparaître pendant la lyse des tissus ou des cellules. Le pipetteur peut être soufflé à plusieurs reprises ou oscillée par l'instrument Vortex jusqu'à ce qu'il soit liquide.Si il a été plus épais, vous pouvez ajouter une quantité appropriée de liquide de craquage.

2. Ce réactif ne contient pas d'inhibiteurs de protéase. Veuillez préparer vos propres inhibiteurs de protéase et les ajouter avant utilisation. G2006, G2007, G2008 et d'autres inhibiteurs de la protéase liés de notre société sont recommandés.

3. Veuillez porter un manteau de laboratoire et des gants jetables pendant le fonctionnement.

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