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G2038-100ML Tampon de lyse IP de 100 ml pour précipitations d'immunol

Spécification:100 ml
Application:Lyse des cellules ou des tissus dans des conditions non dénaturantes pour préparer des échantillons de protéines.
Transport et stockage:Transport de sacs à glace humide; Conserver à -20, efficace pendant 12 mois.
ml:
  • G2038-100ML
  • Servicebio

Description du produit

Aperçu

Le lysat IP est un lysat utilisé pour lyser les cellules ou les tissus pour préparer des échantillons de protéines dans des conditions non dénaturantes. Les échantillons de protéines obtenus par clivage de tissus ou de cellules avec ce lysat peuvent être utilisés dans la page, la blot occidental, l'immunoprécipitation, la propriété intellectuelle), la co-IP, la puce (chromatin immunopre-cipitation), l'ELISA et d'autres expériences.

Les principaux ingrédients de ce produit sont de 25 mm Tris-HCl, NaCl de 150 mm, 1 mM EDTA, 1% NP-40 et 5% Triton X-100. Il peut être appliqué sur des échantillons de tissu et de cellules animales ou végétales, et il peut également être utilisé pour les échantillons fongiques ou bactériens.


Pnom de produit

Cà. Non.

Spécise

Tampon de lyse IP

G2038-100ML

100 ml

Utilisation du produit

Composant

G2038-10ML

Tampon de lyse IP

100 ml

Usage:

Des inhibiteurs de la protéase sont fournis. Le lysat IP doit être ajouté avec des inhibiteurs de protéase avant utilisation. G2006, G2007, G2008, etc., sont recommandés pour prévenir la dégradation des protéines. Le lysat IP mentionné dans l'utilisation suivante signifie que les inhibiteurs de la protéase ont été ajoutés.


Pour les échantillons de tissus:

1. Les blocs de tissus ont été lavés avec du PBS pré-refroidi (G4202 recommandé) pour éliminer les taches de sang, puis couper en petits morceaux et placés dans l'homogénéisateur.

2. Ajoutez un volume tissulaire 10x de tampon de lyse IP et d'homogénat à basse température (il est recommandé d'utiliser un instrument de meulage de tissu à grande vitesse KZ-III-F et KZ-III-FP, qui est développé et produit indépendamment par ServiceBio). Remarque: la quantité de lysate IP peut être ajoutée dans un rapport d'environ 50 mg de tissu à 1 ml de lysat. Si la teneur en protéines de tissu est faible, la posologie de lysat peut être réduite pour augmenter la concentration en protéines dans une solution d'extraction brute.

3. Transférez l'homogénéat vers un tube de centrifuge de 1,5 ml et osciller. Bain de glace pendant 30 min, au cours de laquelle la pipette a été soufflée de manière répétée pour assurer la lyse complète de cellules de tissu à chaque 10 min;

4.Pour 12000g échantillons, il doit être centrifugé pendant 5 min et collecter le surnageant, qui est la solution de protéine totale.

Pour des échantillons adhérents:

1. Lavez les cellules avec du PBS pendant 2 à 3 fois et blotez soigneusement le liquide résiduel pour la dernière fois.

2. Verser le lysat IP dans la plaque de culture de la cellule et le ballon selon le rapport de lysace de cellules de 250 μl par puits de la plaque de 6 puits, secouez la plaque de culture et du ballon à plusieurs reprises et faites du lysat complètement en contact avec des cellules pendant 3-5 min.

3. Grattez les cellules avec une spatule cellulaire et collectez-vous dans un tube centrifuge.

4. Centrifuge à 12 000 g pendant 5 min et collectez le surnageant, qui est la solution de protéine totale.

Pour la cellule de suspension:

1. Lavez les cellules avec du PBS pendant 2 à 3 fois et blotez soigneusement le liquide résiduel pour la dernière fois.

2. Verser le lysat IP dans la plaque de culture de la cellule et le ballon selon le rapport de lysace de cellules de 250 μl par puits de la plaque de 6 puits, secouez la plaque de culture et du ballon à plusieurs reprises et faites du lysat complètement en contact avec des cellules pendant 3-5 min.

3. Grattez les cellules avec une spatule cellulaire et collectez-vous dans un tube centrifuge.

4. Centrifuge à 12 000 g pendant 5 min et collectez le surnageant, qui est la solution de protéine totale.

Fou échantillons bactériens ou fongiques

1,1 ml de suspension bactérienne a été prise, le surnageant a été éliminé par centrifugation et le liquide a été lavé une fois avec du PBS pour éliminer complètement le liquide.Vortex pour disperser le plus possible les bactéries.

2.Ajouter 100-200 μl IP Lysate, tourbillonnez doucement pour mélanger les bactéries et le bien lysé.

3. Bain de bain pendant 10 min, au cours de laquelle la pipette a été blown à plusieurs reprises plusieurs fois toutes les 2 minutes pour assurer une lyse complète des bactéries.

4.12000g a été centrifugé pendant 5 min et le surnageant a été collecté, qui était la solution de protéine totale.




Remarques:

1. L'épaisseur peut apparaître pendant la lyse des tissus ou des cellules. Le pipetteur peut être soufflé à plusieurs reprises ou oscillée par l'instrument Vortex jusqu'à ce qu'il soit liquide.Si il a été plus épais, vous pouvez ajouter une quantité appropriée de liquide de craquage.

2. Ce réactif ne contient pas d'inhibiteurs de protéase. Veuillez préparer vos propres inhibiteurs de protéase et les ajouter avant utilisation. G2006, G2007, G2008 et d'autres inhibiteurs de la protéase liés de notre société sont recommandés.

3. La solution de protéine totale obtenue à partir de la pyrolyse de ce produit est compatible avec notre kit de détection quantitative de protéines BCA (G2026).

4.Veuillez porter un manteau de laboratoire et des gants jetables pendant le fonctionnement.


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