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Hoechst 33342 Réactif tache 1 mg / ml Solution pour la coloration fluorescente nucleus

Spécification: 1ml
Numéro de CAS: 23491-52-3
  • G1127-1ML
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Description du produit

Introduction:

HOECHSTST 33342 (BISBENZIMIDE H 33342, HOE 33342) La formule moléculaire est C27H28N6O · 3HCL, le poids moléculaire est de 561,93 et ​​le nombre de CAS est 23491-52-3, qui est un colorant fluorescent bleu qui pénètre dans la membrane cellulaire jusqu'à l'ADN nucleus. Le fluide de coloration est faible dans la solution, mais le renforcement de la fluorescence est collé à la petite rainure de l'ADN dans la région enrichie à la séquence, et est donc utilisée pour la coloration nucléaire ou la coloration conventionnelle de l'ADN.

Ce produit est une solution et la concentration Hoechst 33342 est de 1 mg / ml pour la coloration et la concentration de travail couramment utilisée est recommandée de 0,5 à 10 μg / ml. La longueur d'onde d'excitation maximale de HoechstSt 33342 est de 346 nm, la longueur d'onde d'émission maximale est de 460 nm; Après la liaison avec l'ADN à double brin, la longueur d'onde d'excitation maximale est de 350 nm, la longueur d'onde d'émission maximale est de 461 nm. Le noyau peut être utilisé pour une marque de noyau de cellule ou de noyau de tissu fixe ou non fixe, et peut être testé par microscope fluorescent ou cytomètre à flux, etc.


Stockage et transport

Sac de glace (glace mouillée); -20 ° C protégé de la lumière, 12 mois efficace.

Pas

1. Diluer Hoechst 33342 Solution de coloration (1 mg / ml) avec du PBS ou un autre tampon approprié à 0,5 à 10 μg / ml Hoechst 33342 Solution de réalisation de la coloration;

2. Pour les cellules fixes ou les sections de tissu:

une. Pour des échantillons de cellules fixes ou de tissus, retirez la fixation après fixation et lavez 2 à 3 fois avec du PBS ou un autre tampon approprié pendant 3 à 5 minutes (pour détecter les cellules suspendues, veuillez suivre la méthode de fonctionnement normale des cellules suspendues, toutes les expériences besoin d'ajouter une centrifugation et d'autres étapes);

b. (Étape facultative) Si vous avez besoin d'effectuer des colombages d'immunofluorescence sur des cellules ou des tissus fixes, priorisez les traitements connexes, puis effectuez la coloration Hoechst 33342 après traitement;

c. Prenez une quantité appropriée de solution de travail de la coloration Hoechst 33342 pour tacher les cellules ou les tissus fixes, couvrir l'échantillon et incuber à la température ambiante pendant environ 5 minutes;

ré. Après avoir retiré la solution de travail de la coloration Hoechst 33342, laver 2 à 3 fois avec du PBS ou un autre tampon approprié, à chaque fois pendant 3-5 min;

e. Après avoir monté la glissière ou observer directement sous un microscope à fluorescence, la longueur d'onde d'excitation est de 350 nm et la longueur d'onde d'émission est de 460 nm.

3. Pour les cellules vivantes ou les tissus cultivés:

une. Ajouter une quantité appropriée de solution de coloration Hoechst 33342 à la culture cellulaire, environ 1/10 du volume du milieu de culture cellulaire, qui doit complètement couvrir l'échantillon à colorer; Habituellement, 1 ml de solution de coloration est ajoutée à un puits de la plaque à six puits et un puits de la plaque de 96 puits ajoutez 100 μl de solution de coloration au milieu; incuber dans un incubateur de 37 ° C pendant 10-20 min;

b. Après avoir retiré la solution de travail de la coloration Hoechst 33342, laver 2 à 3 fois avec du PBS ou un autre tampon approprié, à chaque fois pendant 3-5 min;

c. Observez directement sous un microscope à fluorescence, la longueur d'onde d'excitation est de 350 nm et la longueur d'onde d'émission est de 460 nm.

G1127-1ML

Précautions

1. La concentration et le temps d'incubation de la solution de travail de la coloration Hoechst 33342 peuvent être ajustés en fonction de la situation réelle.

2. Les colorants fluorescents ont des problèmes d'éruption. Essayez de terminer le test le même jour après la teinture. Les comprimés de montage de trempe anti-fluorescence (G1401 recommandé) peuvent être utilisés pour ralentir la trempe de fluorescence.

3. Veuillez porter un manteau de laboratoire et des gants jetables pendant le fonctionnement.

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