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Kit d'immunohistochimie Anticorps secondaire anti-lapin pour l'IHC Western Blot

  • G1215-200T

Description du produit

Présentation du produit:

Ce kit est un kit d'immunohistochimie en deux étapes à haute sensibilité, adapté au développement des couleurs ultérieures des anticorps primaires dérivés de lapin. Le kit contient une IgG anti-lapin conjugué par la peroxydase de raifort peroxydase HRP. Ce produit convient aux anticorps primaires dérivés de lapin. Dans les expériences de la SII et de l'Ouest de la BLOT, les anticorps secondaires de la caisse anti-lapins de chèvre de HRP sont identiques à des anticorps primaires dérivés de lapin. L'anticorps (réagit avec l'antigène d'abord) se lie puis réagit avec DAB. DAB est un substrat de la peroxydase de raifort (HRP). Sous la catalyse du HRP, DAB produit des précipités bruns pour atteindre l'amplification du signal et le développement des couleurs.

Contenu du colis:

Numéro d'article du produit

Nom du produit

spécification

G1215-200T

Kit d'immunohistochimie

200 t

Conditions de stockage: transport de la glace humide; Stockez l'anticorps secondaire à -20 ° C et la dilution DAB et 50 × Solution de stock Stock de DAB à 4 ° C; Valable pendant 12 mois.

Composant:

Numéro de composant

Composant

G1215-200T

G1215-1

Diluant dab

12,5 ml

G1215-2

Kit DAB 50 ×

250 μL

G1215-3

Anticorps secondaire d'anti-lapin de chèvre marqué par HRP

100 μL

Manuel d'utilisation

1

Étape

1. Apportez votre propre PBS (recommandé G4202, G0002), réactif de contre-sommeil nucléaire (solution de coloration de l'hématoxyline recommandée G1004, solution de différenciation de l'hématoxyline G1039, Solution bleue d'hématoxyline G1040), alcool dégradé, xylène, comprimés de montage, etc.

2. Préparez la solution de travail de l'anticorps secondaire: diluer l'anticorps secondaire anti-lapin de chèvre marqué HRP avec PBST (pH 7,2-7.4) sur un rapport de 1: 200 pour obtenir la solution de travail de l'anticorps secondaire. Préparé pour une utilisation immédiate, utilisez dans les 48 heures.

Préparer la solution de travail de la couleur de la couleur DAB: ajoutez 20 μl de 50 μl de solution mère DAB sur 1 ml de diluant DAB, mélangez bien pour une utilisation ultérieure.

Instructions:

1. Selon les procédures immunochisochimiques de routine, les sections de tissu sont pré-déparaffinisées, récupération de l'antigène, bloquées et incubées avec l'anticorps primaire, puis lavées trois fois avec du PBS pendant 5 minutes chacune.

2. Incubation d'anticorps secondaire: Ajoutez 50-100 μL de la solution de travail d'anticorps secondaire à chaque tranche pour couvrir complètement le tissu et incuber à la température ambiante pendant 30 à 60 min. Lavez trois fois avec du PBS pendant 5 minutes à chaque fois.

3. DAB Développement des couleurs: Ajoutez 50-100 μL de solution de travail DAB à chaque tranche, incuber pendant plusieurs minutes à la température ambiante, observe sous le microscope pour contrôler le développement des couleurs à l'effet attendu, puis laver immédiatement avec de l'eau pour arrêter la Développement des couleurs.

4. (Facultatif) Retrait des noyaux cellulaires: Les sections sont colorées avec une solution de coloration de l'hématoxyline pendant 3 à 5 minutes, puis lavées à l'eau du robinet; Après différenciation rapide avec la solution de différenciation de l'hématoxyline pendant 3-5 s, lavé à l'eau du robinet; lavé avec de l'eau du robinet ou retourné en bleu avec une solution d'hématoxyline 3-5 s.

5.Mountring: Les tranches sont déshydratées par de l'alcool dégradé selon les marches habituelles, transparentes de xylène et les diapositives sont montées avec une gomme neutre.

Précautions

1. Si l'arrière-plan est trop sombre lors du développement des couleurs immunohistochimiques, envisagez d'étendre le temps de lavage, d'utiliser une solution de blocage appropriée pour le blocage, inactivez la catalase endogène, raccourcissez le temps de développement des couleurs et réduisez la concentration de l'anticorps secondaire. S'il n'y a pas de développement de couleur ou que le développement des couleurs est trop léger, vous pouvez augmenter de manière appropriée la concentration de l'anticorps principal et l'anticorps secondaire pour étendre le temps de développement des couleurs, puis vérifier si l'anticorps secondaire est normalement développé.

2. DAB est nocif pour le corps humain, soyez prudent lorsque vous manipulez et veillez à éviter tout contact direct avec le corps humain ou l'inhalation du corps.

G1215-200TQ

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