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Kit de détection MTT Kit de détection MTT 200T

Volume: 200T

  • G4101-200T
  • Servicebio

Description du produit

Information produit

Nom du produit

Chat. Non.

spécification

Kit de détection MTT

G4101-200T

200 t

G4101-1000T

1000t

Présentation du produit:

Ce kit de détection MTT de produit est largement utilisé dans la prolifération cellulaire et la détermination de l'activité, ainsi que la détection de médicament à cytotoxicité. Le nom complet du MTT est le 3- (4,5-diméthyl-2-thiazolyl) -2,5-diphényl-2-h-tétrazolium bromure, et le nom chinois est bleu thiazole. Le principe de détection est que le succinate déshydrogénase dans la mitochondrie des cellules vivantes peut réduire le substrat exogène MTT au formazan bleu-violet insoluble dans l'eau (formazan) et le gisement dans les cellules, tandis que les cellules mortes n'ont pas de cette fonction. Ensuite, utilisez le diméthylsulfoxyde (DMSO) pour dissoudre les gisements de formazan dans les cellules et mesurer la valeur d'absorption de la lumière à 490 nm ou 570 nm avec un lecteur de microplaté. Dans une certaine gamme de nombres de cellules, la quantité de formation de formazan est le nombre de cellules vivantes est directement proportionnelle. Selon la valeur d'absorbance mesurée (valeur OD), le nombre de cellules vivantes peut être jugé. Plus la valeur OD est grande, plus le nombre de cellules vivantes et plus l'activité cellulaire (si la toxicité de la drogue est mesurée, cela signifie que la toxicité de la drogue est inférieure). Lorsque vous utilisez ce kit pour détecter la viabilité cellulaire, le surnageant doit être aspiré après la réaction. Il ne peut donc pas être utilisé pour la détection de cellules suspendues. Si vous devez détecter des cellules suspendues, il est recommandé d'utiliser d'autres produits de notre société (Kit G4103 CCK-8).

Stockage et transport

Transport avec glace humide; Conserver à 4 ° C dans le noir avec une période de validité de 3 mois; ou stocker à -20 ° C dans le noir avec une période de validité de 6 mois. Évitez la congélation répétée et la décongélation.

Composant

Numéro de composant

Composant

G4101-200T

G4101-1000T

G4101-1

Fluide de travail MTT

10 ml

2 × 25 ml

G4101-2

DMSO

20 ml

4 × 25 ml

Manuel de l'utilisateur du produit

1 pc

1 pc

Étapes d'opération:

1. Traitement adhérent de cellules: après les cellules adhéré au mur, ajoutez des médicaments et une transfection en fonction de la conception expérimentale;

2. Test de viabilité cellulaire: ajoutez 20 μL de solution de travail MTT à chaque puits et incubez-vous pendant 4 h dans un incubateur de cellules;

3. Retirez le surnageant: Une fois l'incubation terminée, une petite quantité de cristaux violettiers apparaîtra au bas de la plaque de puits, qui peut être observée sous un microscope 40x. Utilisez une pipette pour aspirer soigneusement la solution de surnageant dans le puits (ne sucez pas les cristaux violet en bas);

4. Développement des couleurs: ajoutez 100 μL DMSO à la plaque de puits, incuber à 37 ° C pendant environ 15 minutes (vous pouvez toucher le bas de la plaque avec votre doigt et le secouer légèrement) et attendre que les cristaux violets se dissolvent. Si les cristaux violet sont plus petits et moins, le temps de dissolution sera plus court; Si les cristaux violet sont plus grands et plus, le temps de dissolution peut être étendu de manière appropriée;

5. Détection: Mesurez l'absorbance à une longueur d'onde de 490 nm ou 570 nm. Si le filtre 570 NM n'est pas disponible, un filtre de 560 à 600 nm peut être utilisé.

Remarques:

1. Le DMSO se solidifiera à une température plus basse et peut être reconstitué à 37 ° C sans affecter son utilisation.

2. Le principe de détection de ce kit repose sur la réaction catalysée par déshydrogénase. S'il y a plus d'agents réducteurs (tels que certains antioxydants) dans l'échantillon qui interférera avec la détection, essayez de les supprimer.

3. Pour votre sécurité et votre santé, veuillez porter des manteaux de laboratoire et des gants jetables pour fonctionner.

Le produit est à des fins de recherche scientifique uniquement, pas pour le diagnostic clinique!

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