TÉLÉPHONER

+86 (027) 5111 3188

catégorie de produit

Partager sur:

Réactif de transfection PEI 40K pour réactif de transfection de biologie cellulaire

Spécification: 10ml
  • G1802-10ML
  • Servicebio
  • Servicebio

Description du produit

G1802-10ML

Introduction:
Le réactif de transfection PEI 40K (réactif de transfection de polyéthylèneimine linéarisé) est un polymère cationique de haute charge ayant une polyéthylèneimine linéaire en tant que corps principal avec un poids moléculaire de 40000, dont les courroies chargées positivement et peuvent être efficacement combinées à l'acide nucléique négatif, forme une complexe et est introduit dans la cellule. Le réactif de transfection de polyéthylène de polyéthylène linéarisé (Pei 40K) est faible toxique, une efficacité de transfection élevée et un faible coût, est un réactif de transfection instantané de cellule très populaire. Le réactif de transfection Linéaire PEI 40K actuellement éprouvé est largement utilisé dans une variété de lignées cellulaires, notamment Hek-293, Hek293T, CHO-K1, COS-1, COS-7, NIH / 3T3, SF9, Hepg2 et HeLa, etc., Efficacité de la transfection jusqu'à 80% ~ 90%.

Stockage et transport

Sac de glace (glace mouillée); Conservation de 4 ° C, valable 6 mois.

Pas

1. Préparations Avant la transfection de cellules adhérentes (plaque 6-puits à titre d'exemple, reportez-vous à la table jointe pour d'autres spécifications):

a) la veille de la transfection, plantez les cellules uniformément dans la plaque de puits à une densité appropriée, et il est conseillé que les cellules convergent à 70-85% au cours de la transfection formelle;

b) Avant la transfection, retirez le milieu de culture cellulaire d'origine, lavez-vous 1 à 2 fois avec du PBS et remplacez 1,8 ml de support de base sans sérum ou peu sérique (moins de 5%), ou Opti-Mem; Différentes cellules dépendantes du sérum dépendent du sérum sont différentes, ajustées en fonction de types de cellules spécifiques.

c) Placez les cellules remplacées dans l'incubateur et commencez à préparer le complexe de transfection.

2. Préparations avant la transfection de cellules de suspension:

a) le jour de la transfection, centrifuger la quantité appropriée de cellules à éliminer le milieu et à les remettre en suspension dans un milieu de base sans sérum (moins de 5%);

b) Placez les cellules de suspension préparées dans l'incubateur et commencez à préparer le complexe de transfection. Le rapport de volume entre le complexe de transfection et le milieu de culture peut être réglé en référence au rapport de cellules adhérentes.

3. Préparation du complexe de transfection:

a) Préparer une solution A: 100 μL de milieu basal sans sérum et 2 μg d'ADN plasmidique, mélangez bien par pipetage;

b) préparer la solution B: 100 μl de milieu basal sans sérum et 6-8 μl de réactif de transfection PEI 40 K, mélangez bien en soufflant et en aspirant;

c) Ajouter une solution B à la solution A, mélanger doucement en pipetage et incuber à la température ambiante pendant 15 minutes pour former un complexe de transfection ADN-PEI.

4. Cellules transfectées:

a) Ajoutez le complexe de transfection obtenu à l'étape précédente en tirant une croix ou un cercle à la plaque de puits précédemment remplacée;

b) Tenez la plaque de puits et dessinez un \"8 \" sur la surface plane ou secouez doucement la plaque de culture d'une autre manière pour le rendre complètement mélangé et incuber dans un incubateur de 37 ° C, 5% de CO2;

c) Le complexe de transfection ADN-PEI est incubé avec les cellules pendant 4 à 6 heures pour avoir une meilleure efficacité de la transfection. Une incubation prolongée ou nuitée aura une meilleure efficacité de la transfection.

Précautions

1. Veuillez utiliser des cellules saines en bon état. Il est recommandé que les cellules récupérées soient passées au moins 2 fois avant la transfection.

2. Veuillez utiliser des plasmides sans endotoxine de haute qualité.

3. Les niveaux de sérum élevés pendant la transfection et l'utilisation d'antibiotiques peuvent affecter l'efficacité de la transfection et l'état de la cellule.

4. La tolérance et la sensibilité de différentes cellules sont différentes. La longueur du temps d'incubation de la transfection et du rapport de l'utilisation de l'Î.--Mon PEI / ADN peuvent être ajustés en fonction de la situation.

5. Ce produit n'est utilisé que pour la recherche scientifique, pas pour l'homme.

6. Veuillez porter des manteaux de laboratoire et des gants jetables pendant le fonctionnement.

Tableau ci-joint: Utilisation de la transfection de différents navires de culture cellulaire (pour référence uniquement)

Navire de culture

Zone de croissance

(Cm2)

Nombre de cellules inoculées

Quantité d'ADN

(ug)

Pei

(ΜL)

Volume complexe de transfection(ΜL)

capacité totale

(Ml)

Plaque 96Well

0.3

(2-4) × 104

0.1

0.3-0.4

10

0.1

Plaque 24Well

1.9

(1.2-2.4) × 105

0.5-1

1.5-4

50

0.5

Plaque 12Well

3.8

(2.4-4.8) × 105

1-2

3-8

100

1

Assiette 6Well

9.5

(6-10) × 105

2-4

6-16

200

2

10 cmpetri plat

55

(4-6) × 106

12-24

36-96

1000

12

Flacon T75culture

75

(6-10) × 106

18-36

54-144

1000

15

Ce produit est à des fins de recherche scientifique uniquement, pas pour le diagnostic clinique!

G1802-10MLtéléchargerSlice 12Slice 13Slice 10Slice 14

Contact us

Liens rapides

catégorie de produit

Entrer en contact

 5ème étage, 22 bâtiment, Biopark, Gaoxin 2e route n ° 388, zone de développement de haute technologie de l'Est, Wuhan, Hubei, Chine 430079
 +86 (027) 5111 3188
Copyright © 2021 Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd.